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檢驗大腸菌群、金黃色葡萄球菌常見問題

  一、大腸菌群
  大腸菌群:是只一群能發酵乳糖、產酸、產氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏無芽孢桿菌 。該菌主要來源于人畜糞便。
  檢測該菌的方法主要有MPN法,平板計數法。
  法中主要用到的是LST、BGLB、EC肉湯等。
  平板計數法主要用DC、VRBA等。
  在檢測該菌時易出現的問題:
  LST、BGLB、EC等在滅菌時小倒管中氣泡排不盡。
  氣泡不易觀察。
  VRBA、DC平板上菌落特征不易辨認。
  原因:
  在分裝LST、BGLB、EC時,小倒管中有水柱;此外,高壓滅菌時,需急排氣,滅菌后迅速冷卻。
  觀察氣泡時,要對光傾斜試管,使小倒管緊貼在試管壁上,便于觀察。
  熟悉大腸桿、大腸菌群在上述平板上的特征,必要可做一些陽性的對照。有些食物殘渣會影響觀察結果,這樣需要我們在培養前仔細觀察平板的狀態,大的食物殘渣可以做一些標記。
  二、金黃色葡萄球菌
  金黃色葡萄球菌:是人類化膿感染中較常見的病原菌,可引起局部化膿感染,也可引起肺炎、敗血癥等,其毒性的強弱取決于產生的毒素和侵襲性酶,例溶血素酶、殺白細胞素、血漿凝固酶、脫氧核糖核酸酶。
  瓊脂上金黃色葡萄球菌有黑色的菌落中心,周圍有半透明的卵磷脂沉淀環。
  甘露醇卵黃瓊脂上的特征是菌落黃色,周圍也有卵磷脂沉淀環。
  甘露醇高鹽瓊脂上的菌落特征與甘露醇卵黃瓊脂上的菌落特征相同,不過,菌落周圍沒有卵磷脂沉淀環。
  金黃色葡萄球菌在B-P上的菌落特征
  檢樣中常見的問題:
  平板的狀態:透明、有絮狀物。
  凝固酶實驗的觀察。
  原因:
  不同的廠家的培養基平板制好后的狀態有所不同,主要取決于亞碲酸鉀卵黃增菌液的不同。我們公司采用的雞蛋是山雞蛋,卵磷脂含量較高,因此制備好的平板一般透明度較好,接種金黃色葡萄球菌后,菌落特征較易觀察。
  在添加亞碲酸鉀卵黃增菌液時,溫度的掌握,不宜太高,過高易使卵黃變性,也不應太低,太低瓊脂易凝固。
  將金黃色葡萄球菌接種到兔血漿上后,每半小時觀察一次,觀察凝固時,將血漿輕輕傾斜或慢慢倒置,如有流動,既證明沒有凝固。如若不明顯,可補做DNA酶實驗。
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